由于其特异性的和分化的细胞施加了无法逾越的屏障，因此将生物载体递送至气道上皮细胞具有很大的挑战性。在载体中，重组蛋白提供了治疗前景，但缺乏有效的递送方法限制了它们的发展。于此，美国爱荷华大学Paul B. McCray Jr.教授使用工程化两亲性肽实现了将蛋白质和SpCas9或AsCas12a核糖核蛋白（RNP）递送至培养的人高分化气道上皮细胞和小鼠肺中。这些与GFP蛋白或CRISPR相关核酸酶（Cas）RNP非共价结合的穿梭肽，可快速进入培养的人纤毛和非纤毛上皮细胞和小鼠气道上皮细胞。实验表明，与SpCas9或AsCas12a RNP结合的穿梭肽的滴注可实现ROSA^mT/mG小鼠气道上皮中loxP位点的编辑。而且穿梭肽广泛分布于呼吸道范围内，但并没有发现具有短期毒性。这项基于肽的技术为蛋白质和Cas RNP输送至难治性气道上皮细胞提供了潜在的治疗途径。

Krishnamurthy, S.; Wohlford-Lenane, C.; Kandimalla, S.; Sartre, G.; Meyerholz, D. K.; Théberge, V.; Hallée, S.; Duperré, A.-M.; Del’Guidice, T.; Lepetit-Stoffaes, J.-P.; Barbeau, X.; Guay, D.; McCray, P. B., Engineered amphiphilic peptides enable delivery of proteins and CRISPR-associated nucleases to airway epithelia. Nature Communications 2019, 10 (1), 4906.

https://doi.org/10.1038/s41467-019-12922-y