睡美人（SB）转座子系统是哺乳动物细胞中一种有效的非病毒基因转移工具，但其使用受到DNA载体转座酶基因活性不受控制、基因组不稳定的风险以及无法直接使用转座酶蛋白等因素的困扰。近日，德国欧洲分子生物学实验室Orsolya Barabas与维尔茨堡大学Michael Hudecek的研究团队合作，开发出一种高溶解度的睡美人（SB）转座酶系统，其可提高基因插入的效率。基于过度活跃的SB100X变体的晶体结构，研究人员使用了合理的蛋白质设计来创建具有增强的溶解性和稳定性的SB转座酶（高溶解度SB，hsSB）。研究人员证明，hsSB可以与转座子DNA一起传递，从而遗传修饰细胞系和胚胎、造血和诱导多能干细胞（iPSCs），克服了不受控制的转座酶活性。研究人员使用hsSB产生了嵌合抗原受体（CAR）T细胞，在体外和异种移植小鼠中均显示出强大的抗肿瘤活性。研究人员发现hsSB可自发穿透细胞，从而无需使用转染试剂即可修饰iPSC和生成CAR T细胞。每个基因组仅需两次整合，hsSB即可以调节基因组整合频率。

Irma Querques, Andreas Mades, Cecilia Zuliani, et al. A circadian clock is essential for homeostasis of group 3 innate lymphoid cells in the gut. Nature Biotechnology, 2019.

DOI: 10.1038/s41587-019-0291-z

https://www.nature.com/articles/s41587-019-0291-z