技术上的局限性阻碍了对单个分子（包括假定的干细胞调节因子）如何分布于组织和干细胞壁龛的理解。近日，瑞士联邦理工学院Timm Schroeder的研究团队，开发出一种可用于定量分泌分子的三维全组织数字成像方法，并揭示骨髓中缺少CXCL 12梯度。研究人员报告了近距离结扎实验(PLA)的适应性，在三维定量策略和软件中，用多个额外的荧光通道对单个蛋白质进行大体积的原位成像。利用该平台，研究人员通过粒细胞集落刺激因子(G-CSF)处理来量化单个CXCL 12趋化蛋白消耗前后的骨髓(BM)分布。研究人员发现CXCL 12分布广泛，局部富集，但无长期梯度，与目前关于CXCL 12如何控制骨髓内造血干和祖细胞(HSPCs)迁移的假设相反。这条用于离散数字定量、大体积、多色成像的管道，具有最高的单分子敏感性，可广泛应用于任何抗体表位和组织，进一步了解组织和细胞间的相互作用。

Leo Kunz, Timm Schroeder. A 3D Tissue-wide Digital Imaging Pipeline for Quantitation of Secreted Molecules Shows Absence of CXCL 12 Gradients in Bone Marrow. Cell Stem Cell, 2019.

DOI: 10.1016/j.stem.2019.10.003

https://www.cell.com/cell-stem-cell/fulltext/S1934-5909(19)30424-2