单细胞免疫印迹分析的进展,促进了从癌症发展到干细胞生物学等影响生物系统的细胞间变异的探索,引起了人们的极大关注。有鉴于此,上海交通大学的Xianting Ding、Haiyang Xie等研究人员,报道了一种四唑功能化的光点击水凝胶,用于单细胞蛋白质组分析。
本文要点
1)该凝胶可作为十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳的分子筛分基质和凝胶内免疫印迹的蛋白质固定化支架。
2)在很短的时间(60s)的长波紫外线照射下,它可以有效地捕获凝胶中电泳分离的蛋白,用于随后的抗体原位孵育。
3)它的性能在不同药物处理的GES-1/MGC803细胞系中P-糖蛋白表达的细胞间变化中得到了证明。
4)与单细胞免疫印迹方法相结合,使用这种光活性凝胶可以同时监测≈2000中单个细胞的微妙蛋白质表达水平变化,这些变化可能被传统技术所掩盖。
该凝胶具有电泳分离能力强、蛋白质光固定化效率高、自发荧光低等优点,可作为一种很有前途的光活性聚丙烯酰胺凝胶,用于毛细管和微流控免疫印迹分析,特别是在开发新型单细胞免疫印迹方法方面具有广阔的应用前景。
参考文献:
Ting Zhang, et al. A Photoclick Hydrogel for Enhanced Single‐Cell Immunoblotting. Advanced Functional Materials, 2020.
DOI:10.1002/adfm.201910739
https://onlinelibrary.wiley.com/doi/abs/10.1002/adfm.201910739