细胞状态的改变通常伴随着多个microRNA (miRNA)水平的同时变化。因此，对多种miRNA生物标志物进行同时超敏检测对于早期的癌症诊断具有重要意义。复旦大学刘建伟教授和刘宝红教授提出了一种简便的单分子荧光成像检测方法，该方法仅使用一种捕获型抗DNA/RNA抗体(S9.6抗体)具可同时检测多个miRNA，且具有超灵敏的性能。

本文要点：

（1）实验将与miRNA-21和miRNA-122杂交的两个互补DNA (cDNAs)的5‘端用Cy3 (cDNA1)和Cy5 (cDNA2)染料进行标记。杂交后，miRNA-21/cDNA1和miRNA-122/cDNA2复合物均可被预先修饰在盖玻片表面的S9.6抗体捕获。

（2）随后，实验利用单分子荧光装置对盖玻片表面的Cy3和Cy5染料进行成像。通过对绿色和红色通道中Cy3和Cy5染色分子的斑点进行计数，可以对miRNA-21和miRNA- 122的数量进行定量。结果表明，该方法具有较高的特异性和敏感性，并且还可用于同时检测人肝癌细胞(HepG2细胞)中的多种miRNA。综上，这一研究为同时超敏检测多种miRNA的表达提供了一种新的生物传感平台，其在癌症的早期诊断领域具有良好的应用前景。

Hongding Zhang. et al. Simultaneous and ultrasensitive detection of multiple microRNAs by single-molecule fluorescence imaging. Chemical Science. 2020

DOI: 10.1039/d0sc00580k

https://pubs.rsc.org/en/content/articlelanding/2020/sc/d0sc00580k#!divAbstract