以纳米级分辨率捕获活细胞群的动态是一项重大挑战，主要是由于现有显微镜技术的速度分辨率此消彼长，也就是说速度和分辨率两者不可兼得。流式细胞术能提供足够的通量，但缺乏子样本的细节。于此，以色列理工学院Yoav Shechtman和Lucien E. Weiss等人展示了一种具有成像功能的流式细胞术。

本文要点：

1）其中流式细胞术的点检测器被相机替换以记录2D图像，通过点扩展函数工程与3D定位显微镜兼容，其将发射器的深度编码为由相机捕捉的发射图案。

2）通过使用与样品缓冲液混合的荧光珠校准成像系统的深度依赖性响应来实现从感兴趣的亚细胞物体中提取3D位置。该方法能够实现每分钟高达数万个物体的4D成像，并且可以用于表征染色质动力学以及活癌细胞中纳米颗粒的摄取和空间分布。

Weiss, L.E., et al. Three-dimensional localization microscopy in live flowing cells. Nat. Nanotechnol. (2020).

https://doi.org/10.1038/s41565-020-0662-0