细胞内转运控制着受体信号传导、发病机制、免疫反应和纳米药物的命运,这些过程通常是通过使用共聚焦显微镜观察荧光标记物的共定位来跟踪的。然而,这种方法吞吐量低,受显微镜分辨率的限制,可能会错过短暂的相互作用。为了解决这一问题,澳大利亚莫纳什大学Angus P. R. Johnston等人开发了一种由淬灭的SNAP-tag底物(SNAPSwitch)组成的定位传感器,其可通过点击化学反应与生物分子结合。
本文要点:
1)通过SNAPSwitch可以使用流式细胞仪对活细胞内目标位置的运输进行定量检测。利用SNAPSwitch,跟踪了DNA复合物从内体进入胞浆和细胞核的运输过程。
2)研究发现,抗转铁蛋白或透明质酸受体的抗体在内吞作用后最初被分成不同的隔室。此外,通过此方法还可以分辨细胞膜材料位于哪一侧。
综上所述,SNAPSwitch是一种高通量和广泛适用的定量跟踪细胞内材料定位的工具。
Laura I. FitzGerald, et al. A molecular sensor to quantify the localization of proteins, DNA and nanoparticles in cells. Nat. Commun., 2020.
DOI: 10.1038/s41467-020-18082-8
https://doi.org/10.1038/s41467-020-18082-8