细胞游离DNA(cfDNA)因其在诊断癌症等疾病方面的巨大潜力而备受关注。然而,由于假阳性信号的存在和靶向特异性引物设计的困难,通过扩增方法实现对cfDNA的检测仍具有局限性。基于CRISPR-Cas的荧光生物传感器已经开发出来,但还需要扩增步骤才能进行检测。在此,韩国西江大学Jeong-Woo Choi、SOL Bio公司Se-Hwan Paek等人首次开发了基于CRISPR-Cas12a的核酸无扩增荧光生物传感器,利用DNA功能化的金纳米粒子(AuNP)通过金属增强荧光(MEF)检测cfDNA。
本文要点:
1)在通过靶点cfDNA激活CRISPR-Cas12a复合物后,AuNP和荧光团之间的单链DNA(ssDNA)降解,MEF发生了从紫色到红紫色的变化。
2)使用该系统,可以在30分钟内以非常高的灵敏度检测出乳腺癌基因1(BRCA-1)。
3)这种快速且高度选择性的传感器可用于病毒DNA等其他核酸生物标志物的现场可部署和即时检测(POCT)平台。
Jin-Ha Choi, et al. CRISPR-Cas12a-Based Nucleic Acid Amplification-Free DNA Biosensor via Au Nanoparticle-Assisted Metal-Enhanced Fluorescence and Colorimetric Analysis. Nano Lett., 2020.
DOI: 10.1021/acs.nanolett.0c04303
https://doi.org/10.1021/acs.nanolett.0c04303
,