在治疗过程中,检测mRNA的表达是一项十分重要但也极具挑战性的任务。首都师范大学张璐教授、国家纳米科学中心冯强和北京大学王宇光教授设计了一种多层比率荧光纳米探针,并将其用于在单细胞分辨率下对活细胞中的mRNA进行扰动和成像。
本文要点:
(1)实验通过微流体法制备了该纳米探针,它由荧光聚合物内核和多个脂质层组成,可以有效地将siRNA和分子信标(MBs)递送到细胞溶质中,然后依照设计的顺序释放“货物”。从外部脂层释放的siRNA分子会使得耐多药性1(MDR1)基因沉默,而中部脂层中的MBs则可以对MDR1 mRNA进行检测。
(2)实验结果表明,在siRNA治疗期间,MBs与荧光聚合蛋白的荧光信号比值与MCF-7/ADR细胞中的MDR1 mRNA表达水平呈正相关的关系。因此,这一研究所开发的纳米探针技术为量化mRNA提供了传统的qPCR的可比较结果,其在体内外都具有广阔的应用潜力。
Jianqiao Chang. et al. Multilayer Ratiometric Fluorescent Nanomachines for Imaging mRNA in Live Cells. Small Methods. 2020
DOI: 10.1002/smtd.202001047
https://onlinelibrary.wiley.com/doi/10.1002/smtd.202001047