癫痫是一种严重威胁人类健康的慢性神经退行性疾病。越来越多的证据表明，癫痫的病理进展与过氧亚硝酸盐(ONOO^-)密切相关。不幸的是，由于缺乏合适的成像探针来确定ONOO^-在癫痫患者大脑中的波动水平，如何理解ONOO^-在癫痫中的生理作用仍然具有一定的挑战性。海南医学院Rui Wang和于法标教授构建了一种近红外(NIR)双光子(TP)荧光探针[二氰甲烯基-4H-吡喃(DCM)-ONOO]，并将其用于在活细胞和红藻酸盐(KA)诱导的大鼠癫痫模型中对ONOO^-进行可视化研究，证明了其具有良好的灵敏度和选择性。

本文要点：

（1）探针由近红外TP DCM荧光团和识别部件二苯基磷酰胺组成。探针与ONOO^-反应10min后，其磷酰胺键会被断裂，并且由于恢复了分子内的电荷转移过程而发出强烈的荧光。研究表明，该探针能有效检测活细胞和大鼠癫痫脑内内源性的ONOO^-的变化，并具有良好的时间和空间分辨率。

（2）影像学结果表明，ONOO^-水平的升高与KA刺激下的癫痫和严重的脑神经元损伤密切相关。低剂量的白藜芦醇可有效抑制ONOO^-过表达，从而缓解神经元损伤。在癫痫脑组织TP荧光成像的帮助下，研究人员推测认为ONOO^-的异常水平有望作为癫痫诊断的一个潜在指标。而这一研究所开发的基于DCM-ONOO的TP荧光成像也为了解癫痫的病理和实现癫痫诊断提供了一个新型方法。

Xianzhu Luo. et al. Indication of Dynamic Peroxynitrite Fluctuations in the Rat Epilepsy Model with a Near-Infrared Two-Photon Fluorescent Probe. Analytical Chemistry. 2021

DOI: 10.1021/acs.analchem.0c04529

https://pubs.acs.org/doi/10.1021/acs.analchem.0c04529