为了示踪细胞内完整的生物过程，需要对组装/拆卸过程进行连续观察，而荧光成像在表征这些过程方面是行之有效的。然而，利用荧光的开关来观察活细胞中的组装/拆卸过程还尚未见报道。中科大梁高林教授和南京医科大学徐华娥教授设计了一种新型探针PEA-NBD-Yp，并利用其荧光的开启和关闭来对活HeLa细胞中纳米纤维的串联组装/拆卸进行示踪研究。

本文要点：

（1）体外实验表明，PEA-NBD-Yp可以被ALP有效地去磷酸化以生成PEA-NBD-Y，进而自组装形成具有NBD荧光的纳米纤维。同时，谷胱甘肽（GSH）则能够分解PEA-NBD-Y纳米纤维，并使其荧光关闭。

（2）活细胞成像(结合ALP抑制和GSH阻断)实验表明，在细胞外膜上的自组装纳米纤维会产生荧光On1，在细胞内为On2，而被GSH分解后的荧光则为Off2。综上所述，这一研究开发的探针能够实现时间分辨的荧光信号开/关，可作为一种新型工具以深入了解活细胞中的生物事件。

Miaomiao Zhang. et al. Using Fluorescence On/Off to Trace Tandem Nanofiber Assembly/Disassembly in Living Cells. Analytical Chemistry. 2021

DOI: 10.1021/acs.analchem.1c00220

https://pubs.acs.org/doi/10.1021/acs.analchem.1c00220