氨肽酶N(aminopepdase N, APN)是一种能够从N端有丙氨酸的肽中分离出N端氨基酸的酶,其在癌症的生长、迁移和转移过程中起着关键作用。然而,由于目前可用的APN响应型荧光团在细胞质中是可溶性的,因此会迅速离开酶的反应位点并扩散到整个细胞质中,因此这类分子探针往往很难获得可靠的原位信息。湖南大学宦双燕教授和Hong-Wen Liu报道了一种新型的沉淀荧光团HBPQ,它完全不溶于水,在405 nm激光激发下会产生出强烈的黄色固态发光。
本文要点:
(1)由于HBPQ可以通过酚羟基的保护-脱保护作用来控制固态荧光,实验进一步利用HBPQ设计了一种APN响应型荧光探针HBPQ-A,并将其用于对细胞内的APN进行成像。研究表明,HBPQ-A不仅可以对不同细胞器(如溶酶体、线粒体、内质网等)中的APN进行原位成像,而且还可以产生稳定且不易扩散的荧光信号,从而能够对APN在活细胞中的分布进行描绘。
(2)此外,实验通过对4T1肿瘤中的APN进行实时成像发现,HBPQ-A所产生的高保真荧光信号在12 h后仍然能保持不变,进一步证明了其具有很好的抗扩散能力和长期可靠的成像性能。综上所述,这一研究表明沉淀型的荧光团在用于长期原位成像方面有着很好的应用价值。
Yongchao Liu. et al. Precipitated Fluorophore-Based Molecular Probe for In Situ Imaging of Aminopeptidase N in Living Cells and Tumors. Analytical Chemistry. 2021
DOI: 10.1021/acs.analchem.1c00280
https://pubs.acs.org/doi/10.1021/acs.analchem.1c00280