基于活性的E2结合酶（E2）-泛素（Ub）探针是研究E3连接酶（E3）催化泛素化分子机制的有效工具。然而，现有的基于活性的E2-Ub探针的制备依赖于重组技术和生物结合化学，限制了其结构的多样性。有鉴于此，清华大学的刘磊等研究人员，报道了用于E3连接酶催化转硫结构分析的E2泛素活性探针的化学合成。

本文要点

1）研究人员报道了一种通过基于酰肼的天然化学连接的E2酶变体的简便的全化学合成方法，这使得构建一种结构上新的基于活性的E2 Ub探针用于共价捕获Cys依赖的E3s的催化位点。

2）化学交联与质谱联用（CXMS）证明了这种新探针在Nedd4和Parkin介导的转硫反应中形成的中间体的结构分析中的实用性。

本文研究结果说明了化学蛋白质合成在开发用于生物学研究的蛋白质探针方面的实用性。

参考文献：

Lei Liu, et al. Chemical synthesis of activity-based E2-ubiquitin probes for the structural analysis of E3 ligase-catalyzed transthiolation. Angewandte Chemie, 2021.

DOI：10.1002/anie.202105870

https://onlinelibrary.wiley.com/doi/10.1002/anie.202105870