具有高时空分辨率和高检测灵敏度的活细胞成像有助于研究细胞结构和功能的动态变化。然而,从活细胞中提取高分辨率的4D(三维空间加时间)信息仍然具有挑战性,因为目前的方法很慢,需要很高的峰值激发强度或受到高失焦背景的影响。有鉴于此,美国纪念斯隆-凯特琳癌症中心的Alexandros Pertsinidis等研究人员,开发出体积干涉测量格子光片成像技术。
本文要点
1)研究人员提出了三维干涉晶格光片(3D-iLLS)成像,这是一种需要低激发光水平的技术,通过结合4Pi干涉法和选择性平面照明,提供高背景抑制和大幅提高体积分辨率。
2)研究人员证明,3D-iLLS的轴向分辨率和单粒子定位精度分别为100纳米(FWHM)和<10纳米(1σ)。
3)研究人员展示了3D-iLLS在一系列系统中的表现:单个信使RNA分子、细胞核中转录调节因子的纳米级组合、微管细胞骨架和线粒体细胞器。
本文研究表明,3D-iLLS增强的4D分辨率和增加的信噪比将促进对亚细胞水平的生物过程的分析。
参考文献:
Bin Cao, et al. Volumetric interferometric lattice light-sheet imaging. Nature Biotechnology, 2021.
DOI:10.1038/s41587-021-01042-y
https://www.nature.com/articles/s41587-021-01042-y