目前，由于缺乏能够实现原位可视化的技术，研究者对于细胞外囊泡(EVs)是如何从细胞中分泌的仍然不够了解。香港中文大学Chung Hang Jonathan Choi设计了一种对pH可逆的双吡咯亚甲基硼(BODIPY)荧光探针，并将其用于对活细胞分泌的EVs进行共聚焦成像而不会引起严重的细胞毒性。

本文要点：

（1）在基本条件下，该探针主要为非荧光的无色-BODIPY形式，但在被酸化后，它会逐渐切换到具有荧光的母体BODIPY形式。这种pH值所引起的转变使其能够在弱碱性培养基中对酸性EVs(如富含CD81的外泌体和细胞外多泡体)以及在弱碱性细胞质中对细胞内酸性前体EV进行成像。与常亮染料相比，其产生的假阳性信号很少。

（2）实验将该探针与质粒转染进行联合应用，揭示了一些EVs通过微管通道从细胞伪足中被分泌的过程。综上所述，该探针可为研究EVs的细胞外运输提供重要的机制见解，并进一步推动EVs纳米药物的发展。

Hanzhuang Liu. et al. A pH-Reversible Fluorescent Probe for in Situ Imaging of Extracellular Vesicles and Their Secretion from Living Cells. Nano Letters. 2021

DOI: 10.1021/acs.nanolett.1c03110

https://pubs.acs.org/doi/10.1021/acs.nanolett.1c03110