开发一种能够快速、高灵敏度检测血清中抗体的方法将有助于实现对疾病和感染的早期诊断和对治疗性抗体的剂量优化。基于蓝色荧光素酶Nluc和绿色荧光蛋白(FP)之间的生物发光共振能量转移(BRET)的LUMABS生物发光检测(更名为mNeonGLUMABS,其中mNeonG是mNeonGreen的缩写)传感器mNeonGreen已经被证明能够直接快速检测血清中的抗体。然而,一些mNeonG-LUMABS传感器的灵敏度较低,因此有必要开发能够提高其灵敏度的有效策略。中科院深圳先进技术研究院储军研究员和金宗文副研究员设计了一个明亮的绿色FP(Clover4),其可通过结构引导的绿色FP Clover突变所获得。
本文要点:
(1)尽管Clover和mNeonGreen具有相似的亮度和荧光光谱,但Clover4-LUMABS传感器能够表现出增加的动态范围(最大20倍)和更低的检测限(LOD)(最大5.6倍),这主要是由于Clover4在LUMABS中的定位与Nluc更为平行所导致的。
(2)实验结果表明,模块化设计的Clover4-LUMABS可作为一种通用的BRET系统以用于快速、高灵敏度的血清抗体检测。
Mengying Deng. et al. A Genetically Encoded Bioluminescent System for Fast and Highly Sensitive Detection of Antibodies with a Bright Green Fluorescent Protein. ACS Nano. 2021
DOI: 10.1021/acsnano.1c05164
https://pubs.acs.org/doi/10.1021/acsnano.1c05164