细胞中的线粒体功能会随着年龄增长和神经退行性变而下降,这在很大程度上是由于线粒体DNA(mtDNA)的累积突变所导致的,而这种突变则起源于DNA修复缺陷。目前,如何对这种修复活性进行测量也是一项极具挑战性的研究任务。斯坦福大学Eric T. Kool利用荧光探针(UBER)以在原位观察线粒体碱基切除修复(BER)活性,该探针能够与BER活性产生的AP位点进行快速反应。
本文要点:
(1)实验将探针注入培养的细胞中,发现其能够定位于线粒体并产生信号,从而能够选择性地观察mtDNA BER中间体。此外,该探针表明在氧化应激下的DNA修复活性会升高,并会对糖基酶活性的抑制产生反应。
(2)与此同时,实验也利用该探针揭示了氧化应激的开始和BER的初始阶段之间具有时间间隔。实验结果表明,细胞中MTH1的缺失会导致细胞在氧化应激下需要更高的BER活性,而OGG1活性的缺失则会限制糖基化能力,并增加DNA损伤的积累。
Yong Woong Jun. et al. Fluorescence Imaging of Mitochondrial DNA Base Excision Repair Reveals Dynamics of Oxidative Stress Responses. Angewandte Chemie International Edition. 2021
DOI: 10.1002/anie.202111829
https://onlinelibrary.wiley.com/doi/10.1002/anie.202111829