CD4⁺T细胞是适应性和先天性免疫反应的核心媒介，在体内构成了HIV的一个主要储存者。对静息的人类CD4⁺T细胞的详细调查被排除在外，因为缺乏有效的基因操作方法，这限制了人们对HIV复制的理解，也限制了治疗方法的寻找。有鉴于此，德国慕尼黑大学的Oliver T. Keppler、Manuel Albanese等研究人员，实现人类静息CD4⁺ T细胞的快速、高效基因编辑。

本文要点

1）研究人员通过使用优化的细胞培养和Cas9引导的RNA核糖核蛋白复合物的核染条件，报告了一种快速、高效的人类静息CD4⁺ T细胞基因编辑方法。

2）多达六个基因，包括人类免疫缺陷病毒（HIV）依赖性和限制因子，被单独或同时敲除，并进行了功能鉴定。

3）研究人员展示了将双链DNA供体模板敲入不同的内源性位点，从而能够在单细胞分辨率下研究细胞和病毒成分的生理性相互作用。

本文研究的这种技术可以改善HIV生物学和静息CD4⁺ T细胞免疫功能的分子和功能特征。

参考文献：

Manuel Albanese, et al. Rapid, efficient and activation-neutral gene editing of polyclonal primary human resting CD4⁺ T cells allows complex functional analyses. Nature Methods, 2021.

DOI：10.1038/s41592-021-01328-8

https://www.nature.com/articles/s41592-021-01328-8