体内共聚焦显微镜和双光子显微镜是探索小鼠LN中免疫细胞动态行为的有力工具，其穿透深度分别为~100和~300 μm。有鉴于此，美国康奈尔大学的Chris Xu、Kibaek Choe等研究人员，研究表明，活体三光子显微镜可以观察小鼠淋巴结的整个深度。

本文要点

1）研究人员使用眼底三光子显微镜通过其整个深度（600-900 μm）来观察了腘窝淋巴结（LN）。

2）研究人员确定了在淋巴细胞迁移中引起可测量的扰动的激光平均功率和脉冲能量。

3）在允许的参数范围内的长波长三光子成像能够对整个LN血管进行体内成像，并测量LN整个深度的T细胞区CD8⁺ T细胞和CD4⁺ T细胞的运动性。

4）研究人员观察到，在脂多糖诱导的炎症期间，T细胞区的初始CD4⁺ T细胞的运动性取决于深度。

本文研究表明，活体三光子显微镜有可能研究体内LN较深区域的免疫细胞行为。

参考文献：

Kibaek Choe, et al. Intravital three-photon microscopy allows visualization over the entire depth of mouse lymph nodes. Nature Immunology, 2022.

DOI：10.1038/s41590-021-01101-1

https://www.nature.com/articles/s41590-021-01101-1