对活细胞中的蛋白质的进行时空检测是一个重大的研究挑战,也是理解细胞生物学和发展诊疗技术的关键。湖南大学蒋健晖教授和唐昊副教授使用亲和性可调的多肽探针开发了一种双纳米孔生物传感器,其能够在单个活细胞中对蛋白质丰度及其浓度变化进行无标记和时空监测。
本文要点:
(1)实验通过筛选亲和度可调的多肽探针后发现,中亲和度多肽修饰的纳米孔能够对蛋白激酶a(PKA)催化亚基进行可逆和灵敏的检测,检出限为0.04 nM。在活细胞检测中,该传感器也能够有效消除细胞膜电阻和共存物种的干扰。
(2)此外,该传感器还能够被成功地用于监测单个活细胞在不同刺激下的PKA活性的动态变化(PKA催化亚基动态浓度变化)。综上所述,该研究工作可为开发用于活细胞中蛋白质时空分辨检测的纳米孔生物传感器提供一个新的范例。
Hongshuai Zhang. et al. Spatiotemporally Resolved Protein Detection in Live Cells Using Nanopore Biosensors. ACS Nano. 2022
DOI: 10.1021/acsnano.1c10796
https://pubs.acs.org/doi/10.1021/acsnano.1c10796