在生物系统中,许多荧光团/探针都会受到白蛋白的干扰。有鉴于此,中科院化学所马会民研究员和史文研究员提出了一种有效的策略,即通过对白蛋白不敏感的荧光团及其可变的π共轭来克服这种干扰,并设计了一种恶嗪基氨肽酶N(APN)荧光探针来证明该策略的可行性。
本文要点:
(1)研究发现,将丙氨酸通过可切割连接剂修饰恶嗪荧光团中的N原子上会使得探针锁定在非共轭、无色和非荧光的状态,因此其与白蛋白的非特异性相互作用不会产生光谱响应。而APN则可以选择性地切割丙氨酸部分,恢复其大π-共轭和强的荧光发射。
(2)实验通过对不同细胞系中的APN进行成像以及对人血清和小鼠尿液中APN的定量测定证明了该探针具有消除白蛋白影响的能力。综上所述,该研究提出的策略也有望帮助开发用于其他酶的高特异性荧光探针。
Jizhen Shang. et al. An Oxazine-Based Fluorogenic Probe with Changeable π-conjugation to Eliminate False-Positive Interference of Albumin and Its Application to Sensing Aminopeptidase N. Angewandte Chemie International Edition. 2022
DOI: 10.1002/anie.202205043
https://onlinelibrary.wiley.com/doi/10.1002/anie.202205043