无机焦磷酸酶 (PPase) 是一种基金属依赖性水解酶，可催化一个分子的焦磷酸盐 (PPi) 水解为两个分子的正磷酸盐 (Pi)。目前，多项研究报道PPase与多种生物过程显着相关，如糖脂代谢、骨形成和DNA复制。PPase 还参与多种疾病，包括甲状腺功能亢进症、肺腺癌和结直肠癌。此外，PPase 在所有生物体的能量同化中起着至关重要的作用。因此，PPase的灵敏检测和准确定量在临床诊断领域具有重要意义。鉴于此，韩国工业技术研究院Jun Ki Ahn展示了一种基于个人血糖仪方法用于免洗免标记无机焦磷酸酶 (PPase) 的检测，该方法依赖于己糖激酶和丙酮酸激酶促进的级联酶反应 (CER)。

本文要点：

（1）原则上，目标 PPase 的缺失使三磷酸腺苷硫酸化酶能够催化焦磷酸 (PPi) 转化为 CER 的底物 ATP，从而通过有效的 CER 过程显著降低葡萄糖水平。相反，在目标 PPase 存在下，PPi 裂解活性通过将 PPi 分解为正磷酸盐 (Pi) 起作用。因此，不能有效地执行CER过程，这导致由便携式个人血糖仪测量的初始高血糖水平的维持。

（2）基于这种新策略，PPase 活性的定量评估可以在 1.5-25 mU/mL 的动态线性范围内实现，检测限为 1.18 mU/mL。与以往的PPase检测方法相比，该方法无需昂贵且笨重的分析设备以及复杂的洗涤步骤。更重要的是，该方法的诊断能力也通过可靠地检测未稀释的人血清样本中存在的 PPase 得到成功验证，回收率高达 100 ± 2%。

参考文献：

Junhyun Park, Hyogu Han, Chihyun Park, and Jun Ki Ahn. Washing-Free and Label-Free Onsite Assay for Inorganic Pyrophosphatase Activity Using a Personal Glucose Meter. Anal. Chem. 2022

DOI:10.1021/acs.analchem.2c01412

https://doi.org/10.1021/acs.analchem.2c01412