荧光成像是探测生物系统大分子动力学的一种有效方法。然而,目前细胞RNA成像的方法往往受限于研究单个RNA或与固定样本兼容的批量RNA标记方法。普林斯顿大学Ralph E. Kleiner和圣地亚哥州立大学Byron W. Purse开发了一个能够对活细胞中批量RNA动力学进行荧光成像的平台。
本文要点:
(1)实验证明了荧光双环和三环胞苷类似物可以通过过表达尿苷-胞苷激酶2代谢合并到细胞RNA中。三环胞苷衍生的核苷tC代谢喂养能够与共聚焦成像技术相结合以在单细胞分辨率的条件下研究RNA合成、降解和运输。实验也进一步应用该成像模式来研究氧化应激反应期间的RNA代谢和定位,发现NaAsO2处理能够大大加快批量RNA周转。
(2)此外,研究者也发现含有氧化应激产生的RNA转录体的细胞质RNA颗粒与典型的应激颗粒和p-小体不同,并会与RNA解旋酶DDX6共定位。综上所述,该研究工作为实现活细胞RNA成像提供了一种有效方法,并充分揭示了细胞如何通过重塑RNA转录组动力学以应对氧化应激的过程。
Danyang Wang. et al. Live-Cell RNA Imaging with Metabolically Incorporated Fluorescent Nucleosides. Journal of the American Chemical Society. 2022
DOI: 10.1021/jacs.2c04142
https://pubs.acs.org/doi/10.1021/jacs.2c04142