由于缺少合适的化学工具,因此如何有效探测蛋白质特异性糖基化成为了一项极具挑战性的难题。有鉴于此,上海交通大学李娟副教授设计了一种基于糖基化化学探针和邻近诱导FRET信号读取的策略,以实现对活细胞中的蛋白特异性糖基化的可视化成像。
本文要点:
(1)实验首先开发了生物正交型葡萄糖类似物,6-叠氮-6-脱氧-D-葡萄糖(6AzGlc),并将其作为一种新型的糖基化化学探针。随后,实验设计了两种类型的DNA探针,即糖化转化探针和蛋白靶向探针,它们可分别吸附在糖化加合物和靶蛋白上。
(2)蛋白经6AzGlc糖化后,实验将两个DNA探针依次应用于目标蛋白,触发近端诱导的FRET信号读取。实验结果表明,该策略能够被成功地用于对多种蛋白质的葡萄糖糖基化进行可视化,包括PD-L1和整合素等。更重要的是,这种策略使得研究者能够进一步分析糖化蛋白在自然环境中的生物功能。
Zhentao Shao. et al. Visualization of Protein-Specific Glycation in Living Cells via Bioorthogonal Chemical Reporter. Angewandte Chemie International Edition. 2022
DOI: 10.1002/anie.202210069
https://onlinelibrary.wiley.com/doi/10.1002/anie.202210069