次氯酸(HOCl)和过氧亚硝酸盐(ONOO⁻)是两种重要的高活性氧/氮物种，通常会共存于生物系统中，并且能够在许多生理和病理过程中发挥关键作用。为了研究它们的功能和相关性，研究者迫切需要构建具有独特荧光信号的化学工具来跟踪生物系统中HOCl和ONOO⁻的产生。研究发现，香豆素-苯并吡喃(CB)酰肼(螺旋环形式)的香豆素荧光是暗淡的，它们的荧光性质会受到苯并吡喃部分通过分子内光诱导电子转移(PET)过程的控制。基于此机制，西北大学杨小峰教授开发了一种能够同时检测HOCl和ONOO⁻的荧光探针CB2-H。

本文要点：

（1）ONOO⁻可选择性氧化CB2-H的酰肼基，得到母染料CB2 (Abs_max/Em_max = 631/669 nm)。在有HOCl存在的情况下，它会对CB2-H的苯并吡喃部分进行亲电攻击，得到氯化产物CB2-H-Cl，抑制探针内的PET过程，从而在香豆素通道上实现荧光开启响应(Abs_max/Em_max = 407/468 nm)。

（2）由于HOCl和ONOO⁻产物在吸收/发射波长上具有显著差异，因此CB2-H能够在两个独立的通道上同时检测HOCl和ONOO⁻，且没有光谱交叉干扰。在活细胞和斑马鱼体内，实验成功地将CB2-H应用于对不同刺激条件下产生的内源性HOCl和ONOO⁻进行双通道荧光成像。综上所述，该研究开发的探针能够为进一步探索HOCl和ONOO⁻在生物系统中的分布和功能相关性提供重要的工具。

Wenming Huang. et al. Rational Design of a Dual-Channel Fluorescent Probe for the Simultaneous Imaging of Hypochlorous Acid and Peroxynitrite in Living Organisms. Analytical Chemistry. 2022

DOI: 10.1021/acs.analchem.2c03661

https://pubs.acs.org/doi/10.1021/acs.analchem.2c03661