β-葡萄糖苷酶(β-Glu)是一种普遍存在的酶,其在医疗诊断、食品生产和农业等方面具有多种作用。现有的β-Glu检测方法往往操作复杂、运行时间长、且背景噪音较大。有鉴于此,拉筹伯大学Yuning Hong和Zhe (Han) Weng报道了一种用于测定β-Glu活性的红光发射探针TBPG。
本文要点:
(1)实验通过将靶向β-Glu的葡萄糖苷偶联到聚集诱导发光(AIE)荧光团上而合成了该探针。在有β-Glu存在时,TBPG会被水解并呈现荧光开启的过程。研究者也系统地优化了检测条件,包括时间、温度、pH值、缓冲液和探针浓度。结果表明,基于该探针的荧光滴定法具有良好的线性关系(R2 = 0.998),其线性动态范围为0 ~ 5.0 U/mL,检出限低至0.6 U/L。
(2)在无β-Glu和添加β-Glu的情况下,实验通过添加不同的生物种类和离子评价了该探针的检测特异性和抗离子干扰性。随后,实验也进一步展示了该探针TBPG在共聚焦显微镜和流式细胞术等实验中测定活细胞β-Glu活性的适用性。最后,研究者也将该方法应用于实际土壤样品检测。实验结果表明,该方法在土壤酶分析方面具有很好的应用潜力。
Bicheng Yao. et al. A Novel Red-Emitting Aggregation-Induced Emission Probe for Determination of β‑Glucosidase Activity. Biomaterials. 2023
https://www.sciencedirect.com/science/article/pii/S0142961223000546