相干拉曼显微镜是对生物医学样品中化学成分进行无标记实时表征的首选方法。常见的实现方式依赖于在样品上扫描两个紧密聚焦的激光束，这通常会导致样品损坏，并且在大视场下速度较慢。现有的少数宽视场技术的特点是横向分辨率降低，并且不提供轴向切片。为了解决这些实际限制，来自菲涅尔研究所图灵生命系统中心的Hervé Rigneault和Anne Sentenac等人开发了一种稳健的宽场非线性显微镜。

文章要点：

1) 该研究开发的这一显微镜可以将随机照明显微镜（RIM）与相干反斯托克斯拉曼散射（CARS）与和频生成（SFG）对比度相结合，基于全面的理论研究，CARS-RIM从不同散斑照明下获得的多个图像的二阶统计数据中提供了样本的超分辨率重建和光学切片；

2) 此外，研究结果表明，多模式CARS-RIM和SFG-RIM实现了宽场非线性成像 µm轴向剖切能力和300 nm横向分辨率，与传统的点扫描CARS相比，有效地降低了样品处的峰值强度，且研究还探索证实了CARS-RIM和SFG-RIM宽场显微镜在二维和三维中对各种样品（如珠子、未染色的人类乳腺组织和化合物混合物）的无标记、高度对比的化学成像潜力。

参考资料：

Fantuzzi, E.M., Heuke, S., Labouesse, S. et al. Wide-field coherent anti-Stokes Raman scattering microscopy using random illuminations. Nat. Photon. (2023).

10.1038/s41566-023-01294-x

https://doi.org/10.1038/s41566-023-01294-x