活体内双光子显微镜使活体动物的深层组织成像具有高的时间空间分辨率，然而，由于光被厚的矿化骨基质和富含脂肪的骨髓吸收、散射和分散，骨内骨隔室和底层骨髓对光学成像提出了独特的挑战，早期的骨活体内成像方法利用颅骨缝线的间隙来绕过穿透皮质骨的需要。最近，研究人员开发了一种侵入性方法来薄化皮质骨，或植入成像窗口来成像承重长骨的细胞动力学。鉴于此，来自澳大利亚加文医学研究所的Tri Giang Phan等人提供了一个循序渐进的程序，为小鼠胫骨的微创、无损、纵向活体内成像的动物做准备。

文章要点：

1) 该研究开发的这一方法包括使用混合骨髓辐射嵌合体来明确地双重标记破骨细胞和骨形态，胫骨通过简单的皮肤切口和使用导热T型腻子构建的成像室暴露出来；

2) 此外，该研究长达12小时的成像过程可以在多个时间点上重复，以提供进入骨内和骨髓小生境的纵向时间窗口，该方法可用于研究骨重建、癌症细胞生命周期和造血的细胞动力学，以及长期的体液和细胞免疫，该程序需要一个小时才能完成，适用于之前在小动物手术方面专业知识最少的用户。

参考资料：

Bhattacharyya, N.D., Kyaw, W., McDonald, M.M. et al. Minimally invasive longitudinal intravital imaging of cellular dynamics in intact long bone. Nat Protoc (2023).

10.1038/s41596-023-00894-9

https://doi.org/10.1038/s41596-023-00894-9